上清液高速离心（离心机半径 ３ｃｍ，６０００ｒ·ｍｉｎ^－１）１０ｍｉｎ，再取离心上清液过０．４５_μｍ 微孔滤膜，即得。

 

取山药饮片，粉碎，过四号筛（６５目），取约１．０_ｇ，精密称定。其他同上。

 

２．４ 方法学考察

 

２．４．１ 系统适应性试验 尿囊素与其相邻色谱峰的分离度在３．０以上，已达到基线分离；按尿囊素峰计算，理论塔板数（ｎ）为６０００以上；拖尾因子（Ｔ）为１．１０。见图１。

 

 

 

 

 

 

 

 

图１  尿囊素对照品（Ａ）和山药配方颗粒（Ｂ）的 ＨＰＬＣ图

 

Ｆｉｇ１ ＨＰＬＣＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ^（Ａ^）ａｌａｎｔｏｉｎｃｏｎｔｒｏｌ^；（Ｂ^）ＤｉｏｓｃｏｒｅａｏｐｐｏｓｉｔｅＴｈｕｎｂ．ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇｇｒａｎｕｌｅｓ

 

２．４．２ 线性关系考察   分别精密量取对照品贮备液０．２５，

 

０．５，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ｍＬ，置 ５ｍＬ量瓶中，纯水定容，得到１５．６^，３１．２^，６２．４^，１２４．８^，１８７．２^，２４９．６^，３１２_μｇ^·ｍＬ^－１ 系列对照品溶液，上述对照品溶液各取１０_μＬ，注入高效液相色

谱仪测定，以进样质量浓度（_ｇ·ｍＬ^－１）为横坐标，峰面积为 μ

 

纵坐 标，绘 制 标 准 曲 线，回 归 方 程 为：Ｙ ＝８．０５１３Ｘ ＋

０．０２２９^，ｒ＝０．９９９８^，线性范围^：０．１５６～３．１２_μｇ^。

２．４．３ 精密度试验 精密量取上述对照品溶液 （１２４．８_μｇ·ｍＬ^－１）１０_μＬ，连续进样６次，测得尿囊素对应的色谱峰峰面积，结果ＲＳＤ为０．３９％，表明仪器精密性良好。

 

２．４．４ 稳定性试验 精密量取同一对照品溶液 （１２４．８_μｇ·ｍＬ^－１）１０_μＬ，在０，１，２，４，８，１６，２４ｈ分别测定，结果尿囊素峰面积的ＲＳＤ为２．１４％，表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。

 

２．４．５ 重复性试验  取同一批山药配方颗粒（批号１２０６００９）

 

６份进行含量测定，以干燥品计算尿囊素的平均含量为

４．２５４１ｍ· ^－１，ＲＳＤ为１．６３％，结果说明方法的重复性较好。

ｇｇ

 

２．４．６ 回收率试验 尿囊素的平均回收率为９８．９０％，ＲＳＤ为０．６８％（ｎ＝５），测定方法具有一定的准确性。

 

２．５ 样品的含量测定 按前述供试品溶液制备方法和色谱条件，进行制备和测定，进样１０_μＬ，以峰面积计算含量，样品含量测定结果见表１。山药配方颗粒每包０．５_ｇ，相当于山药饮片１０_ｇ，换算成尿囊素在生药中的百分含量，见表

_２。

 

表１  尿囊素含量测定结果

 

Ｔａｂ１ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆａｌａｎｔｏｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ

 

						含量／ · －１
饮片批次							ｍｇｇ
			样品	１	样品	２	样品	３	平均	平均
配方颗粒（	）		４．６７５６		４．６３４９		４．６５５３		４．６５５３
１２０５１１４
配方颗粒（	）		４．２１２１		４．２９３０		４．１８０１		４．２２８４４．４１４８
１２０６００９
配方颗粒（	）		４．３２４７		４．３９６９		４．３６０２		４．３６０６
１２０７００７
小包装（		）			１．８６２１		１．８５８１		１．８５８１１．８５８１
２０１２０６００１０８１．８５４２

 

表２    山药配方颗粒及饮片中尿囊素含量测定结果

 

Ｔａｂ２ ＲｅｓｕｌｔｓｏｆｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｌａｎｔｏｉｎｉｎＤｉ－ｏｓｃｏｒｅａｏｐｐｏｓｉｔａＴｈｕｎｂ．ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇｇｒａｎｕｌｅｓ

 

含量／

饮片批次

％

样品

１

样品

２

样品

３

平均

平均

配方颗粒（

）

０．０２３４

０．０２３２

０．０２３３

０．０２３３

１２０５１１４

配方颗粒（

）

０．０２１１

０．０２１５

０．０２０９

０．０２１２０．０２２１

１２０６００９

配方颗粒（

）

０．０２１６

０．０２２０

０．０２１８

０．０２１８

１２０７００７

小包装（

）

０．１８６２

０．１８５８

０．１８５８０．１８５８

２０１２０６００１０８０．１８５４

 

３ 讨论

 

在选择流动相时，采用杨连菊等^［２］的试验条件，试用不

 

同分析柱^，分离效果均不太理想^，后改用ＦｏｒｔｉｓｕｎｉｖｅｒｓｉｌＣ１８柱，参考韩波等^［４］的方法将流速降到_{０．４ｍＬ}·_ｍｉｎ^－１，结果达到了理想分离效果。

 

山药始载于《神农本草经》，是 “四大怀药”之一，也是药食两用的最常用中药之一。但至中国药典２０１０年版，还没有含量测定项。据杨连菊等^{［２－３］}研究，山药药材、饮片中主要有效成分尿囊素含量下限暂定为_{０．１５％}，韩波等^［４］发现最高至０．９４％。而据测定结果，配方颗粒尿囊素含量换算到生药百分含量只有下限０．１５％的１５％左右，单从主要成分尿囊素这一指标看，有效成分含量太低。

 

近年来，中医药工作者在中药饮片改革方面做了大量的工作，在传统中药饮片的基础上推出了中药新型饮片（包括中药小包装饮片、免煎饮片和超微饮片），其中配方颗粒具有较多优点^［５］：（_１）现代化大生产，优于传统煎煮；（_２）统一质量标准，确保疗效；（３）便于携带，便于服用；（４）便于保管，便于调配；（５）临床使用可随证组方、多途径给药；（６）降低劳动强度，提高环境质量，卫生安全；（７）有利于中药走向世界。配方颗粒饮片正逐步在各医疗单位推广应用，也越来越受到广大医药工作者及患者的重视和欢迎。

 

配方颗粒应用已有十多年，但到目前为止，还未见有配方颗粒的质量标准。虽有 “统一质量标准，确保疗效 ”，“每一种药材都要根据其有效成分的性质，制定质量标准以及检测方法，计算出免煎颗粒与中药饮片两者之间的用量换算关系。同时全成分提取，保持了原饮片的质、气、味，使药效成分更稳定”^［５］。但可能还停留在企业标准，只有尽快提升为国家标准，才有利于配方颗粒质量的规范化、标准化，从而保证疗效确切、稳定。

 

参考文献：

 

［１］ 中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：２７．

 

［２］ 杨连菊，冯学锋，杨京玉，等．生山药与麸炒山药的质量标准研

 

究^［Ｊ^］．中国中药杂志^，２０１０^，３５^（２１^）：２８４６－２８４９．

［３］ 李伟东，刘雪东，杨光明，等．山药片质量标准研究 ［Ｊ］．南京中

医药大学学报^，２０１０^，２６^（６^）：４６１－４６３．

［４］ 韩波，马晓莉，郝丽静，等．无硫山药饮片加工工艺优选 ［Ｊ］．中

药材^，２０１２^，３５^（６^）：８８０－８８３．

［５］ 梅全喜，梅笑风．中药新型饮片的特点与存在问题探讨 ［Ｊ］．亚太传统医药，２００９，５（４）：１－４．

 

^［收稿日期