高效液相色谱法测定咽舒茶中绿原酸含量

 

谢岱 ,林世和,余南才 (武汉市第一医院, 湖北武汉 430022)

 

[  摘要]  目的:建立用高效液相色谱法测定咽舒茶中绿原酸含量的方法。 方法:采用高效液相色谱法, 色谱柱为 O DS-C18 , 流动相:

 

乙腈-0. 4 %磷酸溶液(13 87), 流速为1. 0 m L min- 1 , 检测波长为327 nm 。 结果:绿原酸在0. 004 336 ～ 0. 06 504 g  L -1 范围内峰面

 

积与其浓度呈良好线性关系, 平均回收率为99. 8%, RSD 为0. 8 %。 结论:高效液相色谱法可简便、快速、准确地测定咽舒茶中绿原酸的含量。

 

[  关键词]  含量测定;高效液相色谱法;咽舒茶;绿原酸

 

[ 中图分类号] R272. 2        [ 文献标识码] A         [ 文章编号] 1001-5213(2005)05-0430-02

 

Determination of chlorogenic acid in Yanshu tea by HPLC

 

XIE Dai , LIN Shi-he ,YU Nan-cai(T he First H ospital of Wuhan, H ubei W uhan 430022, China)

 

ABSTRACT :OBJECTIVE	T o establish a HP LC me tho d for determinatio n of	chlo rog enic acid in the Y anshu tea. METHODS  the
HP LC method wa s used.	T he Sim-pack is ODS C18 . T he mobile phase w as ace to nitrile - 0. 4 % pho sphoric acid(13 87)and the flow
rate w as 1. 0 ml  min-1 ,	the detectiv e w avele ng th w as 327 nm. RESULTS	T he calibration curv es we re linear in  the rang e o f

0. 004 336-0. 06 504 g L - 1 for chloro genic acid . T he averag e recove ries of triamcino lo ne acetonide , diphenhydramine hy drochloride , chlorogenic acid we re 98. 6 %,(RSD =0. 93 %). CONCLUSION T he HP LC metho d is used to be simple , quick and accura te fo r sim-ultaneous de te rminatio n o f the chlo ro genic acid in Yanshu tea.

 

KEY WORDS:de terminatio n;HP LC ;Yanshu tea , chloro genic acid

 

 

咽舒茶是由金银花、连翘、板蓝根、鱼腥草、麦冬、甘草等制成袋泡茶剂, 具有清热解毒、利咽润喉的功

 

效 ,临床上主要用于急慢性咽喉炎、干燥性咽炎的治疗。方中金银花为主药 , 选用专属性较强的高效液相色谱法测定其中绿原酸的含量^{[ 1]} , 并对测定方法进行了方法学考察。实验结果表明 ,该法操作简便、快速、准确 ,适合作为本品含量测定方法 。

 

1  材料

 

高效液相色谱仪(LC - 10ATVP 、SPD - 10AVP 、 C TO - 10ASVP),N - 2000 双通道色谱工作站(日本岛津公司);绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号 110753-200212 , 含量测定用);咽舒茶(本院制剂,批号 030828 , 030902 , 030907);甲醇 、乙腈为色谱纯;磷酸为分析纯;水为注射用水。

 

2  方法与结果

2. 1    色谱条件^{[ 1]}   色谱柱为 ODS C18 柱(4. 6 mm ×

 

300  mm , 5 μm ,大连依利特);流动相:乙腈-0. 4 %磷酸溶液(13 87);流速:1. 0 m L min^{- 1} ;柱温 :25 ℃;紫外检测波长 :327 nm ;进样量20 μL 。精密称取绿原酸对照品适量 ,加 50 %甲醇溶液制成每1 mL 含20 μg 的溶液,即为对照品溶液 。

 

2. 2  干扰试验

 

2. 2. 1 溶剂干扰试验 在拟定的色谱条件下 ,将溶剂 (50 %甲醇溶液)20 μL 注入色谱仪中测定 , 结果溶剂

 

 

无干扰。

 

2. 2. 2 空白干扰试验 在拟定的色谱条件下, 按处方比例制备不含金银花的空白样品, 按样品含量测定项下的方法进行测定 ,结果阴性样品未见干扰 。

2. 3 系统适应性试验 在拟定的色谱条件下 ,按样品含量测定项下的方法进行测定, 样品色谱中在绿原酸对照品色谱相应位置上有色谱峰, 并且与其他成分有较好的分离, 见图 1 。保留时间为5. 7 min , 理论塔板数按绿原酸峰计算为6 802 , 各峰与主药峰的分离度均大于1. 5 。表明该色谱条件下 ,柱效和各峰之间的分离度均达到了药典要求。

 

 

 

 

 

 

 

图 1  对照品(A)、样品(B)、空白样品(C)色谱图

 

1 - 绿原酸

 

Fig 1 Ch romatogram s of chemical reference subs tance(A)、s amp le(B) and blank sample(c)

 

1 - chlorogenic acid

 

2. 4 线性回归试验 精密称取绿原酸对照品5. 42 mg , 置50 mL 量瓶中, 加 50 %甲醇溶解并稀释至刻度 (0. 108 4 g L^{- 1} ), 再精密吸取该溶液 1 , 2 , 3 , 5 , 10 ,

 

15  mL分别置20 mL量瓶中,用50 %甲醇稀释至刻度,摇

 

 

[ 作者简介] 谢岱, 女, 主管药师, 电话:027-85855908

中国医院药学杂志 2005 年第 25 卷第 5 期 Chin H osp Pharm J , 2005 M ay , Vol 25 , No. 5	431