乌梢蛇

本品为游蛇科动物乌梢蛇Zaocys  dhumnades (Cantor)  的干燥体。多于夏、秋二季捕捉，剖开蛇腹或先剥去蛇皮留头尾，除去内脏，盘成圆盘状，干燥。

【处方用名】 乌稍蛇、乌蛇、乌稍梢肉、制乌梢蛇。

【规范方法】 乌梢蛇  取原药材，除去杂质、头、鳞片及灰屑，切段。

乌蛇肉  取净乌梢蛇，用黄酒浸润，闷润后取出，除去皮骨，切断晒干。

酒乌蛇  取净乌蛇段，喷淋黄酒，拌匀，闷透后置锅内，用文火加热，炒至微黄色时，取出放凉。

每乌梢蛇100 Kg，用黄酒20 Kg。

【药典方法】  乌梢蛇  去头及鳞片，切寸段。

 乌梢蛇肉  去头及鳞片后，用黄酒闷透，除去皮骨，干燥。

 酒乌梢蛇  取净乌梢蛇段，加入定量黄酒闷透后，置锅内文火炒干，取出放凉。

 每100kg乌梢蛇 ，用黄洒20kg。

【量化方法】 乌梢蛇  取原药材，除去杂质、头、鳞片及灰屑，切段。或卷成圆盘，火熏至表面略呈黑色，晒1-2天。

酒乌梢蛇  取卷成圆盘的乌梢蛇，置可密闭的装有用酒湿润透的容器内，将蛇体埋入砂中，间天倒置容器，12天后即可撕去皮，剥取肉，于50℃烘2小时即可。

【成品性状】 乌梢蛇  蛇体多呈盘状，表面黑褐色或绿黑色，密被菱性鳞片，背部菱片偶数列，其中中央2-4行背鳞起棱，高耸成屋脊状，俗成称“剑脊”，复部可见多见数肋骨密集排列，气腥，味淡。

酒乌梢蛇  本品肉质似干后的腊鱼，长条状，浅棕黄色，肉质上有折去骨刺的痕迹，质韧，气腥，略有酒气。

【鉴别】

1.理化鉴别^[1]

1.1.聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳鉴别：

试剂配制和凝胶制备：分离胶浓度为7.5%，浓缩胶浓度为2.5%。

样品液制备：去样品1g加入生理盐水4ml，研磨成匀浆，以4000rpm离心15分钟，取上清液，加1倍量丙酮，4000rpm离心15分钟，放置冰箱中备用。

电泳分析：取样上清液，加入1/2体积的40%蔗糖液，用微量注射器在凝胶样品池中加样，点样量20μl。上电极液中加入数滴溴酚蓝指示剂示踪。电泳开始时，电流控制在10mA，样品进入分离胶后加大至15mA，待指示剂行至末端约1cm时，即可停止电泳。取出胶版，放入7%乙酸溶液中，固定10分钟，然后加入考马亮示兰R₂₅₀染色液中，脱色半小时。用蒸馏水冲去凝胶表面附着的染料，再放入含20%的甲醇和7%醋酸的脱色液，脱色数小时至背景无色为止。结果：乌梢蛇一级带三条，二级带和三级带各二条，扩散带一条。

1.2.紫外光谱鉴别：取粉末1g，分别用石油醚和无水乙醇各10ml浸泡30小时，前6小时每隔1小时振摇1次，滤过，滤液稀释成一定浓度，置1cm比色池中，UV-265FW紫外分光光度计上测定吸收曲线，扫描范围200-300nm，扫描速度60nm/min。结果乙醇液在210.0nm，石油醚浸出液在215.0、240.0、246.0nm处有吸收峰。其特征与其他蛇类区别。

2.光谱鉴别^[2]

2.1.取样品粉末10g，用石油密脱脂，用蒸馏水100ml浸泡24小时，滤过，滤液浓缩后点于层析滤纸上，以氯仿-乙醇-氨水（85：14：0.2）展开后，喷以0.2%茚三酮显色.置紫外光灯下(254nm)检测.

2.2.取样品提取液1ml，加甲醇1ml溶解，点于硅胶G板上，以异戊醇-冰醋酸-水(18:10:6)，展开15cm，喷以30%硫酸，于105℃烤10分钟，置紫外灯光下(254nm)检测.

3.辅料鉴别 取捣碎过10目筛酒乌梢蛇粉末置试管内，加适量的高锰酸钾溶液和同体积的硫酸，摇匀，将硝普酸钠—吗啉混合液湿润过的滤纸条插入试管内，30分钟内出现蓝色斑点，生品不呈蓝色。^[3]

【检查】 热浸法测定醇溶性浸出物，用稀乙醇作溶剂，不得少于12.0%。

【含量测定】

1.薄层扫描法测定氨基酸的含量^[4]

薄层条件  硅胶GF₂₅₄薄层板，展开剂:正丁醇-并醋酸-水 (19:5:5)展开，室温，上行展开约5小时.显色剂:0.3%%茚三酮-乙醇喷雾显色，置105℃烘5分钟.

扫描条件  λs=487nm，λs=650nm，散射系数SX=7，锯齿扫描。

样品处理  将样品置烘箱中，控温在60℃以下烘烤4小时，粉碎，过40目筛，备用。

供试液制备  精密称取样品粉末1.0g，加入10ml酸性水(49ml蒸馏水中加1ml硫酸)，10ml酸性水，分3次洗涤残渣，合并滤液并至蒸发皿中，在水浴上蒸干后，加入酸性水溶解，并定量转移至2ml容量瓶中，稀释至刻度，备用.

2.甲醛法测定氨基酸的含量 ^[5]

2.1样品炮制:按全国中药炮制规范1988年版所载方法进行炮制。

2.2样品液的制备：取各种炮制后的样品适量，105℃烘1h至干，粉碎.过60目筛，精密称取细粉约5g，加入70%乙醇浸提3次(第1次100m1, 24h;第2次30m1, 4h;第3次20m1, 2h)。时时振摇，合并3次滤液(洗涤残渣至滤液无色后再洗1-2次).水浴蒸至无醇味，加水溶解定容50m1 o精取上述溶液5m1,置阳离子交换柱上端，待缓慢流至树脂面时，用蒸馏水淋洗至无色，改用2%氨水解吸，收集解吸液水浴蒸干，用水溶解，定容25m1，摇匀即得样液。

2.3标准溶液的制备精密称取甘氨酸标准品0.6554g，加蒸馏水溶解，定容10ml，其氨基氮浓度为12.23mg/ml，冷藏备用。

2.4样品液中总氛墓酸的含全测定精取样品液5m1，加蒸馏水75ml，在酸度计上用NaOH溶液调节pH值为7。加l 0ml中性甲醛，搅拌lmin，再用NaOH溶液滴至pH为9。记下加入甲醛后所消耗的NaOH体积数VA。用同法测定空白溶液，所消耗的NaOH体积数为VB，按下列公式计算总氨基酸含量，结果见表下页表

总氨基酸的含量%=[N(VA－VB)X14.008]/W

表1样品中氨基酸含量测定结果

【性味与归经】  甘，平。归肝经。

【功能与主治】  祛风，通络，止痉。用于风湿顽痹，麻木拘挛，中风口眼{歪}斜，半身不遂，抽搐痉挛，破伤风，麻风疥癣，瘰疬恶疮。 

【用法与用量】  9 ～12g 。

【贮藏】 置干燥处，防霉，防蛀。

参考文献

[1]李家实,贾敏如,万德光.中药鉴定学[M].上海:海科学技术出版社,1994:621.

[2]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫生出版社,2000: 243.

[3]许腊英,毛维伦,王伟明,等.醋、盐水、酒3中液体辅料在饮片内定性[J].中国中药杂志,1994,19(5):279.

[4]张莅峡.中药乌梢蛇氨基酸分析及含量测定[J].中药材,1990,13(1):11.

[5] 许腊英,毛维伦,唐慧慧,等.21种动物药饮片中总氮基酸的甲醛法侧定[J].湖北中医杂志,1997,19(3);54～55.