高效液相色谱法测定

 

熊氏定喘口服液中黄芩甙的含量

 

卢全德¹ , 余南才¹ , 史自东² , 杨红武²

 

(1 .武汉市第一医院药剂科, 湖北武汉 430022 ;2 .湖北省医药工业研究院,湖北武汉 430060)

 

熊氏定喘口服液系我院湖北名老中医熊济川近

 

70  年行医之验方 ,为医院制剂室生产的医院制剂 , 由金银花 、酒黄芩 、炙麻黄、苦杏仁 、净蝉蜕组成, 临床上用于小儿热性喘咳, 效果显著 ,本品中黄芩苷含量最高,为了控制其质量 ,本文采用了高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定^{[ 1 ,2]} ,现报告如下。

 

1  仪器与试药

 

1 .1  仪器 高效液相色谱仪:美国光谱物理公司

 

SP2000 泵 , UV1000 紫外检测器, DataJet 数据处理机。CQ-250 超声波仪 :上海超声波仪器厂 。

 

1 .2 试药 黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供, 批号为 0715-9707 。供试品由武汉市第一医院药剂科提供。其他试剂均为分析纯。

 

2  方法与结果

 

2 .1  色谱柱:Inertsil,ODS-3(4 .6 mm id ×150 mm ,

 

5 μm);流动相甲醇-水-磷酸(47 53 0 .2);检测波长

 

277   nm ;柱温室温 ;流量 1 ml·min^-1 。

 

2 .2 线性关系的考察 精密称取黄芩苷对照品 9 .76 mg 至 100 m l 量瓶中, 加甲醇适量 ,超声使溶解,放冷并稀释至刻度, 分别精密量取 2 ,4 , 6 , 8 , 10 ml 置 10 ml 量瓶中 , 加甲醇稀释至刻度 ,得到浓度为 19 .52 ,39 .04 , 58 .56 , 78 .08 , 97 .60 μg·ml^-1 的对照品溶液,分别精密吸取 10 μl, 注入液相色谱仪中测定 , 线性方程为 Y =15311 .40 +63028380 .12X , r =0 .9999 ,表明黄芩苷进样量在 0 .2～ 1 .0 μg 与峰面积积分值呈良好的线性关系。

 

2 .3  精密度试验 取对照品溶液(39 .4 μg·μl^-1)

 

10  μl注入液相色谱仪中 ,重复进样 5 次 , 黄芩苷面积积分值的相对标准偏差 <2 %,表明本方法精密度良好。

 

2 .4 空白试验 配制缺黄芩阴性样品 ,称取适量黄芩药材按正文所述方法实验, 精密吸取上述各溶液

 

[ 收稿日期]     2000-08-10

 

 

10   μl以及黄芩苷对照品 10 μl, 分别注入液相色谱仪中测定 ,可得缺黄芩阴性样品色谱图或黄芩药材色谱图 ,以及黄芩苷对照品色谱图 , 结果表明 ,阴性样品无干扰。

 

2 .5 回收率试验 采用加样回收法 ,取已知含量的样品(981012),分别添加黄芩苷对照品,按上述色谱条件测定,计算回收率, 结果表明, 本法具有良好的回收率。

 

表 1  熊氏定喘口服液中黄芩苷的回收率测定结果

 

	添加量		测出量	回收率		平均回收率	RS D
	/ mg		/m g		/ %	/ %	/ %
7		.94	24 .53		97 .9
8		.09	24 .70		98 .2
15		.17	31 .80		99 .2	97 .8	1 .4
14		.89	30 .95		95 .3
21		.67	37 .82		97 .2
21		.13	37 .56		98 .4
	注	:①制剂中黄芩苷含量为 16 .75mg				②n =6
2 .6		供试品溶液的制备			精密量取本品 5 m l, 置

 

50   ml 量瓶中 ,加水稀释至刻度, 摇匀 , 再精密量取本品 1 ml ,置 10 ml 量瓶中, 用流动相稀释至刻度,摇匀即得。

 

2 .7 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10 μl, 按上述色谱条件测定 ,以下式计算样品中黄芩苷的含量, 测定结果见表 2 。

 

表 2  样品中黄芩苷含量测定结果  mg·ml^-1

 

批号	含量
981011	3 .33
981012	3 .35
981013	3 .22
981110	2 .86
981111	2 .74
981112	2 .88
981207	3 .34
981208	3 .53
981209	3 .43
981210	3 .57

 

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第 26 卷第 4 期

 

2001 年 4 月

 

中国中药杂志

 

China Journal of Chinese Materia Medica

 

 

Vol .26 , No .4

 

Apr .,2001

 

 

3       讨论

 

采用高效液相色谱法对本品中黄芩苷含量进行

 

测定 ,可有效地排除处方中其它成分的干扰, 准确测出黄芩甙的含量 ,方法简单,准确度高, 专属性强, 重现性好,可作为本品质量标准控制的依据。

 

[  参考文献]

 

[  1]  中国药典.一部.1995 .附录 VID .

 

[  2] 季逸云, 黄启娟, 刘柏年.高效液相色谱法测定茵栀黄注射液中黄芩甙的含量.中成药, 1997 , 19(3):9.

 

[ 责任编辑 李 禾]