参芦的质量标准研究

 

林世和^＊，易艳东，余南才（武汉市第一医院中心实验室，武汉市 430022）

 

中图分类号   R284.2；R927.1          文献标识码 A              文章编号 1001-0408（2011）11-1014-03

 

摘 要 目的：建立参芦的质量标准。方法：根据2005年版《中国药典》方法，鉴别参芦的性状、显微特征，检查其水分、总灰分、酸

 

不溶灰分；采用薄层色谱（TLC）法进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。结果：性状、显微特征明显；TLC 斑点清晰、分离度好；人参皂苷Rg1、Re、Rb1的进样量分别在1.01～10.10（r＝0.999 7）、0.69～6.90（r＝0.999 4）、1.01～10.10（r＝0.999 8）μg 范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系，平均回收率分别为99.91％、99.55％、99.65％，RSD 分别为1.54％、1.67％、2.50％（n＝9）。结论：所建标准可用于参芦饮片的质量控制。关键词 参芦；显微鉴别；薄层色谱法；高效液相色谱法

 

Quality Standard of Ginseng Rhizome

 

LIN Shi-he，YI Yan-dong，YU Nan-cai（Central Laboratory，Wuhan First Hospital，Wuhan 430022，China）

 

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the quality standard for Ginseng Rhizome. METHODS：According to Chinese Pharmaco-peia（2005 edition），the property and microscopic characteristics of Ginseng Rhizome，moisture，total ashes content，acid-insolu-ble ashes content were identified by TLC. The contents of ginsenoside Rb1，Re and Rg1 in Ginseng Rhizome were determined by HPLC. RESULTS：The property and microscopic characteristics of Ginseng Rhizome were significant. The spot of TLC were clear and well-separated. The linear range of ginsenoside Rb1，Rg1 and Re were 1.01-10.10（r＝0.999 7），0.69-6.90（r＝0.999 4），1.01-10.10（r＝0.999 8）. The average recoveries were 99.91％，99.55％，99.65％，and RSD of them were 1.54％，1.67％，2.50％（n＝

 

9）. CONCLUSION：The method is suitable for quality control of Ginseng Rhizome decoction pieces.

 

KEY WORDS   Ginseng Rhizome；Microscopic identification；TLC；HPLC

 

人参为五加科植物人参 Panax ginseng C.A.Mey 的干燥根，具有大补元气、补脾益肺等功效。传统认为“人参去芦，不令人吐”。目前，尚未发现参芦的化学成分中有催吐成分，红参芦头、全红参和生晒参芦头对催吐药物敏感的动物如狗、家鸽、猫、猴等均无催吐作用。参芦中同样含有与主根基本相同的化学成分人参皂苷，且含量比主根高2～3 倍。从现代临床研究来看，参芦也无使人呕吐的作用。随着其临床研究和应用越来越广泛，制订参芦的质量标准迫在眉睫。为此，笔者参照2005 年版《中国药典》人参^[1]项下方法对参芦的质量标准进行研究。

 

 

1     仪器与试药

 

PS 240 高效液相色谱（HPLC）仪，包括Prostar 335 UV 检测器、Model 240四元泵、Model 500柱温相、Varian PS 240工作站（美国Varian 公司）；十万分之一电子天平（德国Sartorius 公司）。

 

参芦饮片分别购于武汉市黄陂区永生公药材有限责任公司、武汉市远志药品有限公司、武汉市宏康医药有限公司、武汉天和康佳有限公司、武汉健民药业集团股份有限公司、亳州新兴药业有限责任公司，批号分别为080711、080705、080702、080724、080928、080930；人参皂苷 Rg1（ 批号 ：110703-

 

 

 

表 1  加样回收率试验结果（n＝6）

 

Tab 1  Results of recovery test（n＝6）

 

称样量/g	样品含量/mg	加入量/mg	测得量/mg	回收率/％	x	/％	RSD/％
0.507 3	3.46	3.05	6.62	103.18
0.503 7	3.45	3.05	6.37	96.23
0.504 2	3.44	3.05	6.53	101.16	98.50		3.04
0.505 7	3.45	3.05	6.42	97.68
0.505 6	3.45	3.05	6.40	97.10
0.504 0	3.46	3.05	6.36	95.66

 

量。结果，3 批（批号：20100301、20100302、20100303）样品含量分别为6.84、6.81、6.86 mg·g-1。

3     讨论

 

活血舒筋贴膏在保持该品种原有疗效的前提下，将薰洗

 

＊副主任药师，硕士。研究方向：中药材和中药制剂的质量标

 

准。电话：027-85332366。E-mail：linshihe1974@tom.com

 

·1014·          China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 11

 

 

 

剂改进为巴布贴膏剂，克服了原制剂的缺点。为更好地控制该制剂质量，保证临床疗效，本研究制定了没药挥发油的TLC鉴别法，方法简便、可行；并对主药救必应中的有效成分紫丁香苷的含量采用HPLC 法测定，方法简便、专属性强、重复性好，可有效地控制活血舒筋贴膏剂的质量。

 

参考文献

 

[ 1 ]    罗集鹏，毕培曦. 救必应的形态组织学与高效液相色谱

 

法鉴别[J].中药材，1992，15（12）：24.

 

[ 2 ]  林 彤，梁广华. 高效液相色谱法测定救必应及其制剂中紫丁香苷的含量[J].中国中药杂志，2000，25（11）：671. [ 3 ]  国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2005 年

 

版.北京：化学工业出版社，2005：附录31.

 

（收稿日期：2010-11-03  修回日期：2011-01-28）

 

 

中国药房 2011年第22卷第11期

200425）、人参皂苷 Re（批号：110754-200421）、人参皂苷 Rb1			2.3	检查
（批号：110704-200420）、人参皂苷Rf（批号：111719- 200502）			2.3.1  水分 照水分测定法[1] 测定。
对照品和人参对照药材（批号：120917-200609）均购于中国药			结果，根据测定情况，规定参芦水分
品生物制品检定所，使用前置P2O5 干燥器中减压干燥至恒重；			含量不得超过 14.0％。水分测定结
乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。			果见表1。
2	方法与结果		2.3.2 总灰分 照灰分测定法[1] 测定。
2.1	性状		结果，根据测定情况，规定参芦总灰
	芦头多拘挛而弯曲，长1～4 cm，直径0.3～1.5 cm，具不定		分不得超过9.0％ 。总灰分测定结果
根（		）和稀疏的凹窝状茎痕（芦碗）。质较硬，断面淡黄白色，	见表1。		1  2  3
显粉性，形成层环纹棕黄色，皮部有黄棕色的点状树脂道。香			2.3.3  酸不溶性灰分 照灰分测定		图2  参芦的TLC
					1.混合对照品；2.样品；3.
气特异，味微苦、甘。			法[1]测定。结果，根据测定情况，规定
					人参对照药材
2.2	鉴别		参芦酸不溶灰分不得超过1.0％。酸 Fig  2  TLC  of  Gin-
2.2.1  参芦的显微特征 粉末淡黄白色，树脂道碎片易见，含			不溶灰分测定结果见表1。		seng Rhizome
黄色块状分泌物。草酸钙簇晶直径20～68 μm，棱角锐尖，木			2.4	含量测定	1. mixed control；2. sam-
栓细胞表面观类方形或多角形，壁细波状弯曲。网纹导管和			2.4.1	色谱条件[1，2]    色谱柱：Agilent	ple；3.Ginseng Rhizome re-
梯纹导管直径10～56 μm。淀粉粒甚多，单粒类球形、半圆形			Zorbax ODS C18（250 mm×4.6 mm，5		ference substance

表1       水分、总灰分、酸不溶灰分测定结果

或不规则多角形，直径4～20 μm。脐点点状或裂缝状；复粒由	Tab 1  Determination results of moisture，total ashes，ac-
2～6分粒组成。参芦的显微特征见图1。
	id-insoluble ashes

 

 

 

 

 

 

A                               B                               C

 

 

 

 

 

 

D                              E                               F

图1  参芦的显微特征

 

A.淀粉粒；B.簇晶；C.螺纹导管；D.木栓细胞；E.薄壁细胞；F.树脂道

 

Fig 1 Microscopic characteristics of Ginseng Rhizome

 

A. starch grain；B. clustered crystal；C. spiral duct；D. cork cell；E. parenchyma cell；F. resin passage

 

2.2.2 参芦的薄层色谱（TLC）鉴别 取本品粉末1 g，加三氯甲烷40 mL，加热回流1 h，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水0.5 mL 搅拌湿润，加水饱和正丁醇10 mL，超声处理30 min，吸取上清液加3 倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1 mL 使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材

 

1 g，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf 和人参皂苷Rg1 对照品，加甲醇制成每1 mL 各含 2 mg 的混合溶液，作为混合对照品溶液。照TLC 法^[1]试验，吸

 

取上述3种溶液各1～2 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15 ∶40 ∶22 ∶10）10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于 105 ℃加热至斑点显色清晰，分别置日光、紫外光灯

 

（365 nm）下检视。结果，供试品色谱中，在与对照药材和混合对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。参芦的TLC 见图2。

 

 

 

购买商家	生产企业	批号	产地	含水量	总灰分	酸不溶灰分
				/％	/％	/％
武汉市黄陂区永生公 安徽协和成药业饮片		080711	吉林	15.15	8.04	0.31
药材有限责任公司
武汉市远志药品有限 安徽济人药业饮片		080705	吉林	7.51	8.68	0.37
公司
武汉市宏康医药有限 亳州中药饮片厂		080702	吉林	12.76	5.79	0.31
公司
武汉天和康佳有限公 亳州中药饮片厂		080724	吉林	19.70	6.92	0.34
司
武汉健民药业集团股 安徽协和成药业饮片		080928	吉林	5.37	6.91	0.08
份有限公司
亳州新兴药业有限责 亳州新兴中药饮片厂		080930	东北	12.45	7.70	0.42
任公司

 

μm），柱前加保护柱；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱（0～

 

25 min，19％→19％A、81％→81％B；25～35 min，19％→23A、

 

81％→77％B；35～40 min，23％→29％A、77％→71％B；40～

 

60 min，29％→29％A、71％→71％B；60～70 min，29％→19％

 

A、71％→81％B）；流速：1.0 mL·min-1；柱温：27 ℃；进样量：

 

10 μL；检测波长：203 nm。理论板数按人参皂苷Rg1 峰计算应不低于6 000。色谱见图3。

 

			12			3				12
													3
0	10	20	30	40	50	60 min	0	10	20	30	40	50	60 min
			A							B

 

图3  高效液相色谱图

 

A.混合对照品；B.供试品；1.人参皂苷Rg1；2.人参皂苷Re；3.人参皂苷 Rb1

 

Fig 3 HPLC chromatograms

 

A. mixed control；B. test sample；1.ginsenoside Rb1；2. ginsenoside Re； 3. ginsenoside Rb1

 

2.4.2    对照品溶液的制备 分别精密称取人参皂苷Rg1、人参

 

 

中国药房   2011年第22卷第11期                                                                                             China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 11  ·1015·